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细胞培养过程中遇到这些情况应该如何处理

更新时间:2024-02-02      点击次数:680
细胞培养是指在体外模拟体内环境(无菌、适宜温度、酸碱度和一定营养条件等),使之生存、生长、繁殖并维持主要结构和功能的一种方法。
1.细胞经过运输后,部分细胞由于温度变化及剧烈撞击死亡破碎形成碎片,是正常现象。贴壁细胞可以消化,悬浮细胞直接混匀收集细胞,900-1000rpm(约150g)离心3min,弃上清。加5ml PBS重悬细胞,再900-1000rpm(约150g)离心3min,用新鲜的培养基重悬接种到新的培养瓶。第二次PBS重悬是为了去除碎片,如果平时碎片比较少,传代时可以省略PBS重悬的步骤;如果碎片很多,建议PBS多洗几次。
2.细胞生长不均时,可以将细胞消化吹散后加入新的培养基重新接种或传代。
3.细胞生长缓慢时,可以选择提高血清浓度培养(最高不超过20%),也可以根据细胞生长状态,选择传代细胞到新的培养瓶中继续培养。
4.不同细胞贴壁性差异比较大,所以消化时间差别较大,20s-10min均有可能,具体以细胞消化到相互分离但未脱落,并可以轻轻吹下为准,严禁消化到细胞漂浮。客户消化过度导致细胞死亡、漂浮、生长缓慢,不提供免费售后服务。
5.干冰发货均为两支,客户先复苏一支,若复苏失败及时联系我方并在我方指导下复苏第二支。若客户同时复苏两支均状态不佳,我方不提供免费售后服务。
6.细胞状态正常时,应尽快冻存细胞保种,冻存后应随机抽取一支检测冻存效果。我方不对客户冻存细胞导致死亡负责,客户冻存细胞死亡不提供免费售后服务。
 
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